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ショウジョウバエ気管を用いた上皮系多細胞の運動・接着制御機構の解明


新道 真代1,2,3  津田 玲生2  相垣 敏郎4  林 茂生2

総研大1,理研・CDB2,遺伝研3,都立大4


細胞の運動と接着の変化を伴う上皮の形態変化は、発生過程に重要な役割を果たしている。上 皮が様々に形態変化することで複雑なネットワークを構築するショウジョウバエ気管は、上皮の形態形成を個 体レベルで研究する上で優れたモデルシステムである。上皮細胞の形態変化に関わる因子を網羅的に検索 する為に、酵母のGal4-UASシステムを応用した過剰発現系を用いたスクリーニング(Gene Search(GS)法)を行なったところ、src42A及びsrc64Bを見いだした。野生型における気管形成時 のsrcの発現部位を免疫染色により観察したところ、活性型Srcは細胞アピカル面及び接着面に局在し ていることが明らかとなった。また、不活性型Srcの接着面への局在はほとんど認められなかった。このことか ら、srcは上皮細胞の形態変化に重要な因子であることが考えられた。
そこで、今回我々はsrcと上皮の形態変化に着目して解析を行った。src42A過剰発現胚は気管上皮が 崩壊する表現系を示し、免疫染色ではE- Cadherinの蓄積が認められなかった。更に、気管特異的に発現する因子btlのエンハンサー下流にGal4 をつないだBtl-Gal4系統を用いて恒常活性化型src42A(src42ACA)を過剰発現させたところ、E- Cadherinの蓄積が消失した。逆に、ドミナントネガティブ型 src42A(src42AKM)を過剰発現させたところ、E- Cadherinの過剰な蓄積が観察された。以上のことより、src42AはE- Cadherinを介した接着制御に重要な因子であることが予想された。
一方、野生型における胚発生時のsrc64Bの発現部位をin situにより観察したところ、胚全体で発現していることが明らかとなった。また、src64B変異体(src64BP1)では気管の融合異常が認められ、src64Bも気管形成過程に重要な因子であることが 示唆された。以上のことから、src42Asrc64Bは気管形成を含む上皮の形態変化において協調 的に働いていることが予想される。


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