○岩尾 康宏1 南口 恵理1 黒岩 有一1 久保 英夫2
山口大学理学部自然情報科学科1，都臨床研・総合2
アフリカツメガエル（Xenopus laevis）の受精過程において、精子は３層のゼリー層と卵膜からなる卵外被に接着し、先体反応を起こして 卵膜を通過する必要がある。さらに、卵外被を通過した精子は、先体内膜部分で卵細胞膜と接着し、両者の膜 融合により受精は完了する。これまでに、ウニやホ乳類において、これらの過程にはマトリクスメタロプロテア ーゼ（Matrix Metalloprotease, MMP）が関与していることが示唆されている。今回、アフリカツメガエルの受精にZn2+を配位した マトリクスメタロプロテアーゼが関与していることを明らかにした。 ツメガエルのゼリー層と卵膜に包まれた卵の受精はZn2+のキレート剤であるO- phenanthrolinでほぼ完全に阻止された。また、MMPの特異的阻害剤であるTAPI- 1でもほぼ完全に受精が阻害されたが、TAPI- 1存在下で媒精した卵を洗浄すると受精を再開したことから、TAPI- 1の影響は可逆的と考えられる。一方、ゼリー層と卵膜を除去し、卵細胞膜のみ囲まれた卵の受精はO- phenanthrolin で阻害されたので、卵細胞膜との接着・融合にもZn2+を必要とする分子が関与している可能性が ある。 受精に関与するＭＭＰ活性が精子にあるかどうかを明らかにするため、精子抽出物中のＭＭＰ活性を各種の 消光蛍光型ＭＭＰ人工基質を用いて検索した。精子抽出液中にはNFF-2やNFF- 3を分解する活性があり、とくにMOCAc-Pro-Leu-Gly-Leu-A2pr(Dnp)-Ala-Arg- NH2を分解する活性が高かった。このＭＭＰ活性は受精阻害がおきるＭＭＰ阻害剤で阻害され、 よく相関していた。 さらに、ツメガエル精子細胞膜を抗原として単クローン抗体を作成し、精子抽出物中のＭＭＰ活性の除去をも とにスクリーニングをおこなった結果についても報告したい。
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